BUNSEN本生带您了解ELISA试剂盒失败的原因
成功的实验是个循序渐进的过程影响EL ISA实验结果的因素有很多只有的掌握了实验的细节才能购做出好的实验。
您可知您的ELISA试剂盒实验为什么会失败?下面天津本生小编带大家了解一下。
一、标本的影响
溶血标本及混有红细胞的血清采用E1
ISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素)在洗涤过程中往往难以洗脱它可使H202释放出原生态氧
(0)从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质即显蓝色产生假阳性。所以严重溶血标本禁用。
二、标本受细菌污染
因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶因此 被细菌污染的标本同溶血标本样 亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。
三、标本保存不挡
在冰箱中保存过久的标本在间接法ELISA测定中会导致本底过深 造成假阳性;为克服
上述干扰ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定5d内测定的血清标本可存放于4°C,1周后测定的血清标本应低温冻存 ;冻存后融解的标本
蛋白质局部浓缩分布不均 应充分混合后再测定但混匀时应轻柔不可强烈振荡。
四、标本凝固不全
在工作中有时为了争取时间快速检测 常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清使血清中仍残留部分纤维蛋白原 在EL
ISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块易造成假阳性结果 ;因此血波标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。
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